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貝克曼庫爾特超速流式細胞分選系統(tǒng)有哪些應用
點擊次數(shù):1855 更新時間:2019-03-26
MoFlo XDP超速流式細胞分選系統(tǒng)可對復雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時對其中一種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養(yǎng)、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標細胞的高回收率,特別適用于干細胞等極低含量的細胞研究。
MoFlo XDP可運對各種真核和原核細胞、植物細胞、微生物、浮游生物等進行檢測及分選。專為要求高產(chǎn)量、生物安全性和需要便捷的軟件分析系統(tǒng)的研究者而設計。
一.稀有細胞應用
標記CFSE后通過尾靜脈移植入受者小鼠體內,提取受者小鼠脾臟細胞進行移植細胞檢測??偣矙z測2293萬個細胞,發(fā)現(xiàn)移植細胞已經(jīng)進行6代增殖。R7,R8,R9分別為第5,第4,第3代移植細胞,含量分別在萬分之一左右。含量約為1/10萬的CD133陽性細胞,分選后直接注射裸鼠皮下進行成瘤實驗。
二、低含量,連續(xù)表達細胞同時進行高速四路分選
三、腫瘤干細胞檢測
腫瘤干細胞通常缺乏特異性標記,含量又很低,所以很難被檢測到。腫瘤干細胞和普通腫瘤細胞相比,細胞膜含有有泵動功能的ABC等蛋白家族,是腫瘤耐藥和復發(fā)的決定性因素,因此對腫瘤干細胞的研究具有重要意義。
利用其細胞膜的泵動功能,以小分子活性染料Hoechst33342對腫瘤樣本進行平衡染色,可以檢測到因為泵出Hoechst33342而著色較少的側群細胞(SP,Side Population),此即為腫瘤干細胞。利用泵蛋白抑制劑Verapami同時染色,可以看到側群細胞比例明顯減少或全部消失,能確認SP細胞的位置。其它干細胞,如間充質干細胞、造血干細胞、神經(jīng)干細胞、各種成體干細胞等都可以用這種方法來進行篩選。分選出SP細胞群和非SP細胞群,可以研究基因和蛋白表達差異、致病機理、藥物篩選等生命科學的重大課題。
四、染色體/精子分析分選
MoFlo/ MoFlo XDP高精度信號分辨能力(液流穩(wěn)定、激光/電子系統(tǒng)/PMT噪音低/運算速度快)和高活性收獲細胞(系統(tǒng)清潔度好)的功能在染色體和精子分選中得到的表現(xiàn)。對牛精子分選進行人工授精生產(chǎn)小奶牛在畜牧業(yè)上有很大的經(jīng)濟效益,MoFlo/ MoFlo XDP是可以進行這個應用的分選流式細胞儀,在國內有30臺MoFlo在日夜運轉進行商業(yè)分選。
不同染色體之間的DNA含量差異很小,普通的DNA染料無法區(qū)分23對染色體。利用高功率355nm紫外激光激發(fā)的HOECHST 33258和高功率458nm激光激發(fā)的CA3分別對染色體的DNA進行染色。不同的染色體因其G-C/A-T堿基對的比例不同而被分離開,選中任何一條染色體設門后即可進行高純度分選。染色體分析分選可以應用在高精度FISH、染色體移位、基因定位、染色體序列測定、染色體相關蛋白分析等。
MoFlo XDP可運對各種真核和原核細胞、植物細胞、微生物、浮游生物等進行檢測及分選。專為要求高產(chǎn)量、生物安全性和需要便捷的軟件分析系統(tǒng)的研究者而設計。
一.稀有細胞應用
標記CFSE后通過尾靜脈移植入受者小鼠體內,提取受者小鼠脾臟細胞進行移植細胞檢測??偣矙z測2293萬個細胞,發(fā)現(xiàn)移植細胞已經(jīng)進行6代增殖。R7,R8,R9分別為第5,第4,第3代移植細胞,含量分別在萬分之一左右。含量約為1/10萬的CD133陽性細胞,分選后直接注射裸鼠皮下進行成瘤實驗。
二、低含量,連續(xù)表達細胞同時進行高速四路分選
三、腫瘤干細胞檢測
腫瘤干細胞通常缺乏特異性標記,含量又很低,所以很難被檢測到。腫瘤干細胞和普通腫瘤細胞相比,細胞膜含有有泵動功能的ABC等蛋白家族,是腫瘤耐藥和復發(fā)的決定性因素,因此對腫瘤干細胞的研究具有重要意義。
利用其細胞膜的泵動功能,以小分子活性染料Hoechst33342對腫瘤樣本進行平衡染色,可以檢測到因為泵出Hoechst33342而著色較少的側群細胞(SP,Side Population),此即為腫瘤干細胞。利用泵蛋白抑制劑Verapami同時染色,可以看到側群細胞比例明顯減少或全部消失,能確認SP細胞的位置。其它干細胞,如間充質干細胞、造血干細胞、神經(jīng)干細胞、各種成體干細胞等都可以用這種方法來進行篩選。分選出SP細胞群和非SP細胞群,可以研究基因和蛋白表達差異、致病機理、藥物篩選等生命科學的重大課題。
四、染色體/精子分析分選
MoFlo/ MoFlo XDP高精度信號分辨能力(液流穩(wěn)定、激光/電子系統(tǒng)/PMT噪音低/運算速度快)和高活性收獲細胞(系統(tǒng)清潔度好)的功能在染色體和精子分選中得到的表現(xiàn)。對牛精子分選進行人工授精生產(chǎn)小奶牛在畜牧業(yè)上有很大的經(jīng)濟效益,MoFlo/ MoFlo XDP是可以進行這個應用的分選流式細胞儀,在國內有30臺MoFlo在日夜運轉進行商業(yè)分選。
不同染色體之間的DNA含量差異很小,普通的DNA染料無法區(qū)分23對染色體。利用高功率355nm紫外激光激發(fā)的HOECHST 33258和高功率458nm激光激發(fā)的CA3分別對染色體的DNA進行染色。不同的染色體因其G-C/A-T堿基對的比例不同而被分離開,選中任何一條染色體設門后即可進行高純度分選。染色體分析分選可以應用在高精度FISH、染色體移位、基因定位、染色體序列測定、染色體相關蛋白分析等。